Już w szkole średniej podbijała męskie serca swoją urodą i czarującym uśmiechem. Współpracownicy cenią ją za wrażliwość i serdeczność. Piper Perabo jest córką profesora literatury angielskiej, z pochodzenia Portugalczyka. Jej matka jest Norweżką. Rodzice, dawni hippisi, chcieli dać jej na imię India Star. Aktualne imię zawdzięcza aktorce Piper Laurie. Perabo ma dwóch młodszych braci Noaha i Adama. Piper uczęszczała do Toms River High School North w stanie New Jersey, gdzie pracowała w szkolnej gazecie „Polaris”. W 1994 roku rozpoczęła studia aktorskie na Ohio University. Cztery lata później, po ukończeniu nauki, rozpoczęła pracę w teatrze LaMama w Nowym Jorku. Dorabiała występami w reklamach telewizyjnych. Perabo pojawiła się w dwóch nagradzanych filmach krótkometrażowych Todda Rohala „Single Spaced” (1998) i „Knuckleface Jones” (1999). W 1999 roku debiutowała rolą Sary, dziewczyny fana hip hopu w komediodramacie Marca Levina „Whiteboyz”. Perabo jako agentka FBI Karen Sympathy wraz z animowanymi bohaterami komedii „Rocky i Łoś Superktoś” (2000) Desa McAnuffa, próbowała ratować świat przed zbrodniczymi zapędami Borisa Badenowa (Jason Alexander), Natashy Fatale (Rene Russo) i Fearlessa Leadera (Robert De Niro). Przełom w karierze aktorki nastąpił w 2000 roku. Perabo zagrała wówczas Violet, młodą kobietę marząca o karierze piosenkarki, która poznaje życie wielkiego miasta pracując w barze „Coyote Ugly” w „Wygranych marzeniach” Davida McNally. Za wykonanie piosenki „One Way or Another”, otrzymała nagrodę w kategorii najlepszy występ muzyczny, podczas ceremonii rozdania MTV Movie Awards w 2001 r. Aktorka wcieliła się w lesbijkę, uczennicę ekskluzywnej szkoły z internatem w dramacie „Zagubione” (2001) Léi Pool. Była francuską nastolatką, która przyjechała na wymianę do teksańskiej szkoły średniej w komedii „Cicha woda” (2002) Melanie Mayron. W 2003 roku zagrała w thrillerze „Moje ja” Rolanda Suso Richtera, z Sarah Polley i Ryanem Phillippe. Była jednym z tuzina dzieci państwa Baker w komedii „Fałszywa dwunastka” (2003) Shawna Levy’ego. W komedii przygodowej „Smokiem i mieczem” (2004) Toma Reeve, wcieliła się w piękną, średniowieczną księżniczkę Lunnę. Rok 2005 upłynął Perabo bardzo pracowicie. Aktorka wystąpiła w sześciu filmach. Zagrała m.in. w kontynuacji „Fałszywej dwunastki”, wyreżyserowanej przez Adama Shankmana. Pojawiła się w horrorze „Jaskinia” Bruce’a Hunta i thrillerze „Edison” Davida J. Burke’a. Przeżywała miłosne rozterki w komedii romantycznej „Imagine Me & You” Ol Parkera. Partnerowała Giovanniemu Ribisi i Dennisowi Hopperowi w dramacie kryminalnym „10th & Woolf” Roberta Moresco.